เฮ้ผู้ที่ชื่นชอบกล้องจุลทรรศน์เพื่อน! ฉันเป็นซัพพลายเออร์ของกล้องจุลทรรศน์กล้องสองตาและวันนี้ฉันตื่นเต้นสุด ๆ ที่จะแบ่งปันเทคนิคที่ยอดเยี่ยมสำหรับการเตรียมตัวอย่างเซลล์สัตว์สำหรับกล้องจุลทรรศน์กล้องสองตา ไม่ว่าคุณจะเป็นนักเรียนนักวิจัยหรือเพียงแค่คนที่มีความหลงใหลในการสำรวจโลกด้วยกล้องจุลทรรศน์เคล็ดลับเหล่านี้จะช่วยให้คุณได้รับประโยชน์สูงสุดจากกล้องจุลทรรศน์กล้องสองตา
ก่อนอื่นเรามาพูดกันว่าทำไมการเตรียมตัวอย่างเซลล์สัตว์อย่างถูกต้องมีความสำคัญมาก เมื่อคุณใช้กล้องจุลทรรศน์แบบสองตาคุณต้องการที่จะเห็นเซลล์อย่างชัดเจนและในรายละเอียด ตัวอย่างที่เตรียมไว้สามารถเปิดเผยโครงสร้างและการทำงานของเซลล์ซึ่งเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการทำความเข้าใจกระบวนการทางชีวภาพ
1. การรวบรวมตัวอย่าง
ขั้นตอนแรกในการเตรียมตัวอย่างเซลล์สัตว์คือการรวบรวมตัวอย่าง แหล่งที่มาของเซลล์อาจแตกต่างกันอย่างกว้างขวาง ตัวอย่างเช่นคุณสามารถรวบรวมเซลล์จากตัวอย่างเลือดการตรวจชิ้นเนื้อเนื้อเยื่อหรือแม้แต่จากการเพาะเลี้ยงเซลล์
หากคุณกำลังรวบรวมเซลล์จากตัวอย่างเลือดคุณจะต้องใช้เข็มฉีดยาที่ผ่านการฆ่าเชื้อเพื่อดึงเลือด ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้ปฏิบัติตามโปรโตคอลความปลอดภัยทั้งหมดเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนใด ๆ เมื่อคุณมีเลือดคุณสามารถถ่ายโอนไปยังหลอดทดลอง
สำหรับการตรวจชิ้นเนื้อเนื้อเยื่อมันซับซ้อนกว่าเล็กน้อย คุณจะต้องใช้มีดผ่าตัดหรือเข็มตรวจชิ้นเนื้อเพื่อให้ได้เนื้อเยื่อชิ้นเล็ก ๆ สิ่งนี้ควรทำภายใต้การดูแลของมืออาชีพเพื่อให้แน่ใจว่าทำได้อย่างปลอดภัยและถูกต้อง
การเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นตัวเลือกที่ยอดเยี่ยมหากคุณต้องการศึกษาเซลล์ประเภทเฉพาะ คุณสามารถซื้อสายเซลล์จากซัพพลายเออร์ที่เชื่อถือได้และเติบโตในอาหารเลี้ยงเชื้อ สิ่งนี้ช่วยให้คุณสามารถควบคุมสภาพแวดล้อมที่เซลล์เติบโตและศึกษาภายใต้เงื่อนไขที่แตกต่างกัน
2. การตรึง
หลังจากรวบรวมเซลล์ขั้นตอนต่อไปคือการแก้ไข การตรึงเป็นกระบวนการของการรักษาเซลล์ในสภาพธรรมชาติของพวกเขา สิ่งนี้มีความสำคัญเนื่องจากป้องกันไม่ให้เซลล์สลายตัวและรักษาโครงสร้างของพวกเขา
หนึ่งใน fixatives ที่ใช้กันมากที่สุดคือฟอร์มัลดีไฮด์ คุณสามารถทำสารละลายฟอร์มัลดีไฮด์ได้โดยการเจือจางฟอร์มาลดีไฮด์ในน้ำ ในการแก้ไขเซลล์คุณจะต้องวางตัวอย่างในโซลูชันการตรึงในช่วงระยะเวลาหนึ่ง โดยปกติจะใช้เวลาประมาณ 24 ชั่วโมง แต่อาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับประเภทของเซลล์และการตรึงที่ใช้
อีกทางเลือกหนึ่งคือเอทานอล เอทานอลยังสามารถใช้เป็นตรึงโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับเซลล์ที่มีความไวต่อฟอร์มาลดีไฮด์ คุณสามารถใช้ชุดของโซลูชันเอทานอลที่มีความเข้มข้นต่างกันเพื่อค่อยๆคายน้ำและแก้ไขเซลล์
3. การคายน้ำ
เมื่อเซลล์ได้รับการแก้ไขพวกเขาจะต้องขาดน้ำ การคายน้ำมีความสำคัญเนื่องจากจะกำจัดน้ำออกจากเซลล์ซึ่งช่วยให้พวกมันถูกฝังอยู่ในสื่อที่เป็นของแข็งในภายหลัง
คุณสามารถใช้ชุดของโซลูชันเอทานอลที่มีความเข้มข้นเพิ่มขึ้นเพื่อทำให้เซลล์ขาดน้ำ เริ่มต้นด้วยสารละลายเอทานอลที่มีความเข้มข้นต่ำเช่น 30%จากนั้นค่อยๆเพิ่มความเข้มข้นเป็น 50%, 70%, 90%และในที่สุด 100% แต่ละขั้นตอนควรทำในช่วงระยะเวลาหนึ่งเพื่อให้แน่ใจว่าเซลล์จะขาดน้ำอย่างเหมาะสม
4. การฝัง
หลังจากการคายน้ำเซลล์จะต้องฝังอยู่ในสื่อที่เป็นของแข็ง สิ่งนี้ทำให้ง่ายต่อการตัดส่วนบางของเซลล์เพื่อดูภายใต้กล้องจุลทรรศน์
ขี้ผึ้งพาราฟินเป็นสื่อฝังตัวที่ใช้กันทั่วไป ในการฝังเซลล์ในแว็กซ์พาราฟินคุณจะต้องถ่ายโอนเซลล์ที่คายน้ำไปยังตัวแทนการล้างเช่นไซลีน ตัวแทนสำนักหักบัญชีจะลบเอทานอลออกจากเซลล์และทำให้พวกเขาโปร่งใส
จากนั้นคุณจะต้องวางเซลล์ในแว็กซ์พาราฟินหลอมเหลว แว็กซ์พาราฟินจะแข็งตัวเมื่อมันเย็นลงโดยฝังเซลล์ไว้ข้างใน เมื่อบล็อกพาราฟินเป็นของแข็งคุณสามารถใช้ microtome เพื่อตัดส่วนบางของบล็อก
5. การแบ่งส่วน
การแบ่งส่วนเป็นกระบวนการของการตัดชิ้นบาง ๆ ของเซลล์ฝังตัว ความหนาของส่วนอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับประเภทของเซลล์และการขยายที่คุณใช้
microtome เป็นเครื่องมือพิเศษที่ใช้สำหรับการแบ่งส่วน คุณจะต้องปรับ microtome อย่างระมัดระวังเพื่อตัดส่วนที่มีความหนาประมาณ 5 - 10 ไมโครเมตร ส่วนที่บางเหล่านี้สามารถวางไว้บนสไลด์กล้องจุลทรรศน์
6. การย้อมสี
การย้อมสีเป็นหนึ่งในขั้นตอนที่สำคัญที่สุดในการเตรียมตัวอย่างเซลล์สัตว์ การย้อมสีทำให้เซลล์มองเห็นได้มากขึ้นภายใต้กล้องจุลทรรศน์โดยการเพิ่มสีให้กับโครงสร้างที่แตกต่างกันภายในเซลล์
มีคราบหลายประเภทให้เลือกมากมาย hematoxylin และ eosin (H&E) เป็นการผสมคราบที่ใช้กันทั่วไป hematoxylin คราบนิวเคลียสของเซลล์สีน้ำเงินในขณะที่ eosin คราบสีชมพูไซโตพลาสซึม
ในการคราบส่วนคุณจะต้องวางกล้องจุลทรรศน์สไลด์กับส่วนในจานย้อมสี ก่อนอื่นคุณจะใช้คราบ hematoxylin สักสองสามนาทีจากนั้นล้างออกด้วยน้ำ ถัดไปคุณจะใช้คราบ Eosin ในช่วงเวลาที่สั้นลงและล้างสไลด์อีกครั้ง
7. การติดตั้ง
ขั้นตอนสุดท้ายในการเตรียมตัวอย่างเซลล์สัตว์คือการติดตั้ง การติดตั้งเป็นกระบวนการของการครอบคลุมส่วนที่มีสีด้วยฝาปิดเพื่อปกป้องพวกเขาและทำให้ง่ายต่อการดู
คุณสามารถใช้สื่อการติดตั้งเช่นแคนาดาบัลซัมหรือสื่อการติดตั้งสังเคราะห์ วางสื่อการติดตั้งลงบนส่วนที่เปื้อนแล้ววางผ้าคลุมไว้ด้านบนอย่างระมัดระวัง ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้หลีกเลี่ยงฟองอากาศใด ๆ
กล้องจุลทรรศน์กล้องสองตาสำหรับการดู
ตอนนี้คุณได้เตรียมตัวอย่างเซลล์สัตว์แล้วคุณจะต้องใช้กล้องจุลทรรศน์สองตาที่ดีเพื่อดู ในฐานะผู้จัดหากล้องจุลทรรศน์กล้องสองตาฉันสามารถแนะนำรุ่นที่ยอดเยี่ยมได้
ที่กล้องจุลทรรศน์กล้องสองตา LED 40x 2500xเป็นตัวเลือกที่ยอดเยี่ยม มันมีการขยายที่หลากหลายตั้งแต่ 40x ถึง 2500x ซึ่งช่วยให้คุณเห็นเซลล์อย่างละเอียด แสงไฟ LED ให้แสงสว่างและแสงสว่างทำให้ง่ายต่อการดูตัวอย่าง
อีกทางเลือกที่ยอดเยี่ยมคือGD - 800E (สองตา), GD - 800SM (trinocular)- กล้องจุลทรรศน์เหล่านี้เป็นที่รู้จักกันดีในเรื่องของเลนส์คุณภาพสูงและการก่อสร้างที่ทนทาน พวกเขาเหมาะสมสำหรับวัตถุประสงค์ด้านการศึกษาและการวิจัย
หากคุณกำลังมองหากล้องจุลทรรศน์กล้องสองตาโดยทั่วไปมากขึ้นกล้องจุลทรรศน์กล้องสองตาเป็นตัวเลือกที่ยอดเยี่ยม ใช้งานง่ายและให้ภาพที่ชัดเจนและคมชัดของตัวอย่าง
หากคุณสนใจที่จะซื้อกล้องจุลทรรศน์กล้องสองตาสำหรับความต้องการในการรับชมตัวอย่างเซลล์สัตว์ของคุณอย่าลังเลที่จะเข้าถึง เราอยู่ที่นี่เพื่อช่วยคุณค้นหากล้องจุลทรรศน์ที่สมบูรณ์แบบสำหรับความต้องการของคุณ ไม่ว่าคุณจะเป็นผู้เริ่มต้นหรือนักวิจัยที่มีประสบการณ์เรามีกล้องจุลทรรศน์ที่เหมาะสมสำหรับคุณ ติดต่อเราเพื่อเริ่มการอภิปรายการจัดซื้อและนำการสำรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ของคุณไปอีกระดับ!
การอ้างอิง
- Alberts, B. , Johnson, A. , Lewis, J. , Raff, M. , Roberts, K. , & Walter, P. (2002) ชีววิทยาโมเลกุลของเซลล์ วิทยาศาสตร์การ์แลนด์
- Kiernan, JA (2008) วิธีการทางเนื้อเยื่อวิทยาและฮิสโตเคมี: ทฤษฎีและการปฏิบัติ สปริงเกอร์
- Prescott, DM, Harley, JP, & Klein, DA (2005) จุลชีววิทยา McGraw - Hill
